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[ sección ] Figura 3. Muestreo y Análisis de muestras. Fuente: Propia de cultivo selectivo y diferencial de Agar nitrato y Agar SRSM. Se incubaron por 24 horas a 35°C y se realizó caracterización macroscópica de acuerdo a las características morfológicas de las colonias y micros- cópica utilizando la técnica de tinción según Gram que según la coloración determina si las bacterias son Gram negativas (Fucsia) o Gram positivas (Viole- ta), lo que nos permitió identificarlas en los objeti- vos 4x, 10x y 100x. Para la determinación de la reducción de nitrato de las cepas aisladas se aplicó en tubos de ensayo con el inóculo de cada una de las cepas obtenidas, el reactivo A y B de Griess- Ilosvay, el cual proporciona- ría información de las cepas reductoras mediante un cambio de color en el medio o la ausencia de este, igualmente se procedió a analizar la capacidad de solubilizar fosfatos por parte de estas cepas en un medio solido de Agar SRSM (Sundara- Rao & Sinha. 1963) con púrpura de Bromocresol, en el que se determina esta capacidad por la acidificación del medio, la aparición de halos y cambio de color del mismo. También se realizó el análisis para determinar la patogenicidad de las cepas aisladas, mediante la técnica del número más probable (NMP), esto se realizó aplicando 2 fases, una presuntiva y una confirmativa. Para la prueba presuntiva se inocularon tubos con cada una de las cepas y se incubaron por 24 horas a 35°C. Luego de implementar la metodolo- gía para determinar Coliformes en las muestras de agua residual se realizó el conteo de los tubos positivos. Igualmente se procedió para la fase confirmativa haciendo réplicas de los tubos positivos que resultaron en la fase presuntiva. Finalmente se realizaron repiques de las cepas en medio con Agar nutritivo y se procedió a hacer la conservación de las mismas en donde se utilizó el 67